Задачами лабораторного обследования при постановке ВИЧ-инфекции являются:
- подтверждение диагноза ВИЧ- инфекции;
- определение степени иммуносупрессии (по абсолютному и процентному содержанию CD 4 и CD 8);
- выявление показаний к химиопрофилактике вторичных заболеваний;
- выявление жизненных показаний к неотложному старту антиретровирусной терапии;
Для подтверждения диагноза ВИЧ-инфекции чаще всего используют молекулярно-генетический метод (ПЦР), серологические методы (ИФА и ИБ), вирусологический метод и исследование иммунного статуса (количественная оценка CD-4 лимфоцитов).
1. В основе метода ПЦР (полимеразная цепная реакция) лежит уникальное свойство нуклеиновых кислот (как ДНК, так и РНК) – способность к саморепродукции, которая воспроизводится искусственно (in vitro).
Метод ПЦР применяется для выявления ВИЧ у новорожденных детей, чьи матери являются ВИЧ-инфицированными; для выявления ВИЧ при сомнительном ИБ; для контроля концентрации ВИЧ в крови и для исследования крови доноров.
Метод ПЦР подразделяется на качественный и количественный.
Качественная ПЦР направлена на нахождение генетического материала ВИЧ (ДНК/РНК), то есть, содержится ли непосредственно вирус в крови.
Количественная ПЦР направлена на определение РНК ВИЧ типа 1 в плазме крови с детекцией в режиме реального времени.
2. Серологическая диагностика. Проводится в 3 этапа.
Иммуноферментный анализ (ИФА) позволяет выявлять в крови суммарный спектр антител к структурным белкам вируса иммунодефицита человека. Только в том случае если исследуемая сыворотка или плазма дала дважды положительный результат в ИФА (1 и 2 этапы), она тестируется в подтверждающем тесте иммуноблоттинга (3 этап).
ИФА может дать как ложноотрицательный, так и ложноположительный результат.
- Ложноотрицательный результат ИФА возможен при свежем инфицировании, пока антитела к ВИЧ еще не выработались организмом больного.
- Ложноположительные результаты могут быть получены при обследовании больных хроническими заболеваниями и в некоторых других случаях: административная ошибка в клинике или лаборатории, вакцинации.
В отличие от ИФА иммуноблоттинг способствует обнаружению антител к индивидуальным белкам вируса. На основании результатов ИБ ставится окончательный диагноз ВИЧ-инфекции.
Только при обнаружении в сыворотке крови пациента антител к любым двум или трем гликопротеинам оболочки вируса иммунодефицита человека (gp41, gp120 и gp160) одновременно – пробы являются положительными. При отсутствии в сыворотке крови антител ко всем антигенам пробы оценивают как отрицательные и если в крови присутствуют антитела к одному гликопротеину ВИЧ или каким-либо другим его протеинам, пробы считают сомнительными и требуют проведения повторного исследования.
3. Выделение и идентификация культуры ВИЧ (вирусологический метод) – безошибочный критерий оценки инфицирования. В силу сложности проведения данный метод используют в научных целях и, главным образом, трудных для диагностики случаях. Результаты анализа могут учитываться как положительные, отрицательные или сомнительные.
4. Исследование иммунного статуса.
При установлении диагноза ВИЧ-инфекции осуществляют, как правило, многократное исследование иммунного статуса в динамике для контроля за эффективностью терапии и течением заболевания.
Иммунный статус – комплекс количественных и функциональных показателей, отражающих состояние иммунной системы человека в данный момент времени.
Характерный признак исследования иммунного статуса - проведение его в несколько этапов:
- Клинико-лабораторный – состоит из сбора иммунологического анамнеза и оценки развернутого клинического анализа крови;
- Иммунологический этап – качественная и количественная оценка иммунокомпетентных клеток.
В целом, иммунограмма дает полное представление о состоянии иммунитета пациента. Она состоит из гуморального и клеточного исследования.
Список литературы
- Покровский В.В. Клиническая диагностика и лечение ВИЧ-инфекции. Практическое руководство/ В.В. Покровский//. - М.: ГОУ ВУНМЦ МЗ РФ, 2001. - С. 96.
- Инфекционные болезни: национальное руководство / под ред. Н. Д. Ющука, Ю. Я. Венгерова. - 3-е изд., перераб. и доп. - Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2021. - (Серия "Национальные руководства").
- Инфекционные болезни : учебник для студентов медицинских вузов Е. П. Шувалова, Е. С. Белозеров, Т. В. Беляева, Е. И. Змушко. — 7е изд., испр.и доп. — СанктПетербург : СпецЛит, 2015.