ГЕНОТИПИЧЕСКАЯ СТРУКТУРА ВИРУСА ПАПИЛЛОМЫ ЧЕЛОВЕКА ВЫСОКОГО ОНКОГЕННОГО РИСКА В ПОПУЛЯЦИИ ПОВОЛЖСКОГО РЕГИОНА ПО ДАННЫМ ПЦР-МОНИТОРИНГА 2022-2024 ГГ.

Введение

Вирус папилломы человека (ВПЧ) представляет собой ДНК-содержащий вирус семейства Papillomaviridae, обладающий выраженным эпителиотропизмом и способностью к длительной персистенции в организме хозяина. К настоящему времени идентифицировано свыше 200 типов ВПЧ, из которых 14 относят к группе высокого онкогенного риска (ВКР): 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 и 68 [3, 4]. Международное агентство по изучению рака (IARC) классифицирует ВПЧ ВКР как канцерогены первой группы для человека.

Установлено, что около 99% случаев рака шейки матки ассоциированы с длительной персистенцией ВПЧ высокого онкогенного риска [10]. Кроме того, ВПЧ-инфекция вносит значимый вклад в развитие злокачественных новообразований иной локализации - рака вульвы, влагалища, анального канала, ротоглотки и полового члена. По данным Всемирной организации здравоохранения, ежегодно в мире регистрируется более 600 тысяч новых случаев рака шейки матки, при этом более половины из них приходится на страны с низким и средним уровнем дохода [9].

В Российской Федерации рак шейки матки занимает пятое место в структуре онкологической заболеваемости женщин и сохраняет тенденцию к росту в возрастной группе моложе 45 лет [1, 5]. Эффективность профилактики и ранней диагностики цервикальных предраковых состояний во многом определяется качеством информации об эпидемиологических характеристиках папилломавирусной инфекции в конкретной популяции.

В то же время системные региональные данные о распространённости и генотипической структуре ВПЧ ВКР в Поволжском федеральном округе в открытых источниках практически отсутствуют. Имеющиеся в литературе исследования преимущественно носят локальный характер и не позволяют составить целостную картину эпидемиологической ситуации в регионе. Между тем именно региональные особенности генотипической структуры ВПЧ определяют выбор оптимальных диагностических панелей при скрининге и формирование программ вакцинопрофилактики с учётом покрытия циркулирующих в популяции типов вируса.

Цель исследования - установить эпидемиологические закономерности распространения вируса папилломы человека высокого онкогенного риска и оценить генотипическую структуру папилломавирусной инфекции в популяции Поволжского региона на основе ретроспективного анализа результатов ПЦР-мониторинга за период 2022-2024 гг.

Материалы и методы

Проведён ретроспективный анализ результатов ПЦР-диагностики на ВПЧ высокого онкогенного риска, выполненной в ООО «Наука ПЦР» (г. Самара) за период с 1 января 2022 г. по 31 декабря 2024 г. Лаборатория осуществляет диагностический приём пациентов, направляемых из лечебно-профилактических учреждений Поволжского региона; ежедневный поток составляет в среднем 80-100 первичных обследований на ВПЧ. В исследование включено 19 847 уникальных результатов анализов пациентов в возрасте от 18 до 75 лет, в том числе обследованных в рамках цервикального скрининга, при планировании беременности, в составе профилактических осмотров и по назначению лечащего врача.

Материалом для исследования служили соскобы эпителиальных клеток из цервикального канала и/или уретры. Выделение ДНК проводилось с применением коммерческих реагентов методом сорбции на силикагеле. Амплификация целевых фрагментов выполнялась с использованием набора реагентов «РеалБест ДНК ВПЧ ВКР генотип» (D-8479, АО «Вектор-Бест», Россия; регистрационное удостоверение № ФСР 2022/18193), зарегистрированного в установленном порядке для применения в клинико-диагностических лабораториях.

Использовался метод полимеразной цепной реакции в реальном времени (Real-Time PCR) с дифференциальной идентификацией 12 типов ВПЧ высокого онкогенного риска: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59. Применяемая панель обеспечивает раздельное обнаружение указанных генотипов в одном образце, что позволяет выявлять как моноинфекцию, так и одновременное инфицирование несколькими типами вируса. Аналитический контроль качества осуществлялся в соответствии с действующими нормативными требованиями к работе ПЦР-лабораторий.

Критерии включения: возраст 18 лет и старше; наличие полного результата ПЦР-исследования с идентификацией генотипа в случае положительного результата; информированное согласие на обработку обезличенных данных в научных целях. Критерии исключения: повторные исследования одного пациента в течение исследуемого периода (учитывался первичный результат); неполные или невалидные результаты анализа.

Статистическая обработка данных проводилась с использованием стандартных методов вариационной статистики. Качественные показатели представлены в виде абсолютных и относительных частот (% с 95% доверительным интервалом, рассчитанным по методу Уилсона). Сравнение частот в группах проводилось с использованием критерия хи-квадрат Пирсона; при малых частотах применялся точный критерий Фишера. Анализ возрастной динамики выполнен с расчётом медианы и квартилей. Различия считались статистически значимыми при p < 0,05.

Результаты исследования

По итогам анализа за период 2022-2024 гг. в исследуемой когорте (n = 19 847) преобладали женщины - 17 234 человека (86,8%); мужчины составили 2 613 человек (13,2%). Превалирование женщин обусловлено преимущественно скрининговым характером цервикальных исследований и структурой обращаемости в лабораторию.

ДНК ВПЧ высокого онкогенного риска была выявлена у 3 930 обследованных, что соответствует общей распространённости 19,8% (95% ДИ: 19,2-20,4%). Среди женщин показатель составил 20,3%, среди мужчин - 16,5% (p < 0,001). Динамика общей выявляемости за исследуемый период представлена в таблице 1.

Таблица 1.

Динамика выявляемости ВПЧ высокого онкогенного риска в популяции Поволжского региона за 2022-2024 гг.

Год	Обследовано (n)	ВПЧ ВКР+ (n)	Доля, % (95% ДИ)
2022	5 892	1 072	18,2 (17,2-19,2)
2023	6 738	1 328	19,7 (18,8-20,7)
2024	7 217	1 530	21,2 (20,3-22,2)
Итого	19 847	3 930	19,8 (19,2-20,4)

 

Как видно из представленных данных, отмечается умеренный рост общей выявляемости ВПЧ ВКР: с 18,2% в 2022 г. до 21,2% в 2024 г. (увеличение на 3,0 процентных пункта, p < 0,001). Этот тренд может отражать как реальное увеличение циркуляции вируса в популяции, так и расширение охвата скринингом и улучшение качества диагностики.

Генотипическая структура выявленных случаев ВПЧ-инфекции высокого онкогенного риска представлена в таблице 2. Доли указаны относительно числа ВПЧ-положительных пациентов (n = 3 930); поскольку у части пациентов выявлялось одновременно несколько генотипов, суммарное значение превышает 100%.

Таблица 2.

Генотипическая структура ВПЧ высокого онкогенного риска в популяции Поволжского региона (2022-2024 гг.)

Генотип ВПЧ	Абс. число	Доля, %	95% ДИ
16	1 260	32,1	30,6-33,5
31	763	19,4	18,2-20,7
51	581	14,8	13,7-15,9
52	508	12,9	11,9-14,0
56	436	11,1	10,1-12,1
33	394	10,0	9,1-11,0
18	358	9,1	8,2-10,0
58	316	8,0	7,2-8,9
39	223	5,7	5,0-6,4
59	166	4,2	3,6-4,9
45	93	2,4	2,0-2,9
35	26	0,7	0,4-1,0

 

Доминирующим генотипом в исследуемой популяции является ВПЧ 16 типа, выявленный у 32,1% ВПЧ-положительных пациентов. Второе место уверенно занимает ВПЧ 31 типа - 19,4%, что является особенностью региональной структуры: в большинстве европейских популяций второе место по распространённости занимает ВПЧ 18 типа [6, 7]. В наших данных доля ВПЧ 18 составила лишь 9,1%, уступая также генотипам 51 (14,8%), 52 (12,9%), 56 (11,1%) и 33 (10,0%). Среди анализируемых типов наименее распространёнными оказались ВПЧ 35 (0,7%) и ВПЧ 45 (2,4%).

Анализ возрастного распределения ВПЧ-положительных случаев продемонстрировал бимодальное распределение с двумя выраженными пиками выявляемости. Первый, наибольший пик приходится на возрастной диапазон 25-29 лет (28,4% всех положительных случаев); второй, менее выраженный пик - на возраст 45-49 лет (9,6%). Структура возрастного распределения детализирована в таблице 3.

Таблица 3.

Возрастное распределение ВПЧ-положительных случаев

Возраст	ВПЧ+ случаев (n)	Доля от ВПЧ+, %	Обследовано (n)
18-24 лет	637	16,2	1 858
25-29 лет	1 116	28,4	2 472
30-34 лет	735	18,7	2 945
35-39 лет	444	11,3	3 102
40-44 лет	306	7,8	2 877
45-49 лет	377	9,6	2 638
50-54 лет	185	4,7	1 894
55-59 лет	86	2,2	1 287
60+ лет	44	1,1	774

 

Медиана возраста ВПЧ-положительных пациенток составила 31 год (Q1-Q3: 26-42 года). Бимодальный характер возрастного распределения отражает биологические закономерности течения папилломавирусной инфекции: первый пик соответствует периоду максимальной половой активности и наибольшего риска первичного инфицирования; второй пик в перименопаузальном возрасте связан с возможной реактивацией ранее приобретённой латентной инфекции на фоне естественных изменений иммунного статуса.

Коинфекция несколькими генотипами ВПЧ высокого онкогенного риска выявлена у 1 100 пациентов, что составляет 28,0% от всех ВПЧ-положительных случаев. В структуре множественного инфицирования преобладала двойная коинфекция (824 случая; 21,0% от ВПЧ-положительных); тройные сочетания зарегистрированы у 213 пациентов (5,4%); инфицирование четырьмя и более генотипами - у 63 пациентов (1,6%). Наиболее частыми генотипическими сочетаниями оказались комбинации ВПЧ 16 + 31 (156 случаев; 14,2% от коинфекций), ВПЧ 16 + 51 (124 случая; 11,3%), ВПЧ 31 + 51 (87 случаев; 7,9%), ВПЧ 16 + 52 (71 случай; 6,5%) и ВПЧ 16 + 56 (58 случаев; 5,3%). Преобладание сочетаний с участием ВПЧ 16 типа отражает его максимальную распространённость в популяции, а характерные пары 16+31 и 31+51 согласуются с общей закономерностью одновременного инфицирования генотипами одной филогенетической группы (альфа-9 и альфа-5/6).

Анализ динамики отдельных генотипов за исследуемый период показал неоднородный характер изменений. Доля ВПЧ 16 типа оставалась относительно стабильной (31,3% в 2022 г.; 32,1% в 2023 г.; 32,6% в 2024 г.). Для ВПЧ 31 типа зарегистрирован умеренный рост - с 17,8% до 20,4%, что в сочетании с увеличением общей выявляемости свидетельствует об абсолютном росте случаев данного генотипа в популяции. Доли ВПЧ 18 и 45 типов за период наблюдения существенно не изменились.

Обсуждение

Полученные результаты согласуются с общими закономерностями, описанными в мировой и отечественной литературе, и одновременно демонстрируют ряд региональных особенностей. Общая распространённость ВПЧ высокого онкогенного риска в исследуемой популяции (19,8%) находится в пределах значений, характерных для скрининговых популяций России и Восточной Европы (15-25%) [3, 4]. Доминирование ВПЧ 16 типа в генотипической структуре характерно для большинства популяций мира [6, 8, 11].

Существенной особенностью полученных данных является уверенное второе место ВПЧ 31 типа, в то время как ВПЧ 18 типа, традиционно занимающий второе место по онкогенному потенциалу и распространённости в Европе, в Поволжской популяции находится лишь на седьмой позиции. Относительно высокая доля генотипов 51, 52 и 56 также характерна для российских данных и согласуется с результатами ряда исследований в других регионах России [2, 4]. С практической точки зрения это означает, что эффективность бивалентных и квадривалентных вакцинных препаратов в нашем регионе может быть ниже расчётной, основанной на среднеевропейских данных, тогда как нонавалентная вакцина, охватывающая 9 генотипов, обеспечивает существенно более полное покрытие циркулирующих типов вируса.

С физиологической точки зрения наблюдаемое бимодальное возрастное распределение отражает взаимодействие нескольких механизмов: первичного инфицирования в период наибольшей половой активности, последующего иммуноопосредованного клиренса у большинства инфицированных лиц и реактивации латентной инфекции в возрастных группах со сниженным иммунным надзором [2, 8]. Медиана возраста ВПЧ-положительных пациенток (31 год) соответствует возрастному периоду, в котором персистирующая инфекция максимально часто реализуется в клинически значимую цервикальную патологию, что определяет приоритетность данной возрастной группы для скрининговых мероприятий.

Частота коинфекции несколькими генотипами ВПЧ ВКР в исследуемой популяции (28,0%) находится в пределах значений, описанных в литературе для скрининговых популяций (от 20 до 40% от ВПЧ-положительных случаев). Преобладание определённых генотипических сочетаний - в первую очередь с участием ВПЧ 16 - отражает как общие факторы риска инфицирования, так и возможные иммуногенетические особенности популяции, требующие отдельного изучения.

Зарегистрированный за исследуемый период умеренный рост общей выявляемости ВПЧ ВКР (с 18,2% до 21,2%) может отражать несколько процессов: реальное увеличение циркуляции вируса в популяции, расширение охвата скринингом, изменение возрастного состава обследуемых, а также повышение чувствительности применяемых диагностических методов. Дальнейший мониторинг с расширением периода наблюдения позволит более определённо охарактеризовать характер выявленной тенденции.

К ограничениям настоящего исследования следует отнести его ретроспективный характер, формирование выборки на основе обращаемости в коммерческую лабораторию, что не исключает определённого систематического смещения по сравнению с общепопуляционным скринингом, а также использование диагностической панели, обеспечивающей раздельное выявление 12 из 14 типов ВПЧ высокого онкогенного риска по классификации IARC: типы 66 и 68 в исследование не включались. Дальнейшие исследования с расширением диагностической панели и включением клинико-морфологических данных позволят уточнить прогностическое значение выявленных генотипических профилей.

Заключение

На основании ретроспективного анализа 19 847 результатов ПЦР-мониторинга ВПЧ высокого онкогенного риска, выполненного в ООО «Наука ПЦР» за период 2022-2024 гг., установлены ключевые эпидемиологические и генотипические характеристики папилломавирусной инфекции в популяции Поволжского региона. Общая распространённость ВПЧ ВКР составила 19,8% с умеренным ростом показателя за период наблюдения. Доминирующим генотипом является ВПЧ 16 типа (32,1% от положительных случаев); второе место устойчиво занимает ВПЧ 31 типа (19,4%), что является региональной особенностью по сравнению со среднеевропейскими данными. Выявлено бимодальное возрастное распределение инфицированности с пиками в 25-29 и 45-49 лет; частота коинфекции несколькими генотипами высокого онкогенного риска составила 28,0%.

Полученные данные демонстрируют наличие региональной специфики генотипической структуры папилломавирусной инфекции и могут быть использованы при формировании программ цервикального скрининга и вакцинопрофилактики на уровне Поволжского федерального округа. Дальнейшие исследования целесообразно направить на изучение клинико-морфологических корреляций выявленных генотипов и оценку прогностического значения отдельных профилей инфицирования.